冷胁迫是影向农植物产销量的其主要的环境桃战产品之一。钙依靠性蛋清激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）警报传递数据到細胞并刺激对逆境中成长加载的要点的调节细胞因子，但其监测工作机制尚不明了。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷硝化作用呈现位点探测服务。

日文主题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

简体中文名称：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

企业企业：浙江大学

设计文件：番茄

拜谱提高水平：磷硝化作用掩盖位点检侧

设计要点：

一、探究没想到

1、CPK27在底温胁迫下表达方法上涨，于是怎强茎秆耐寒性性

自始研发显示，CPK27在冷胁迫的条件下得出结论方式上浮。为认证上述没想到，今天中写作者用CPK27的两个人敲除基因突变系（cpk27 #2，#6）开展耐热性测试方法，挖掘CPK27的转录技术偏态少于照表组（图1a-b）。在CPK27得出结论方式被抑止的草木中，对耐热性的提高用处偏态减低。进三步的亚体组织细胞品牌定位与激活卡研发显示，冷胁迫推动CPK27向体组织细胞质积少成多，并提高其磷碱化技术（图1 f）。免疫细胞印子讲解进三步表达冷胁迫诱惑 CPK27 在核内蛋白质丰度增添、胞内丰度削减，外源CaCl₂进行处理可方面医治cpk27的冷特别敏感表型，显示CPK27依赖症Ca²⁺4g信号表现用处。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖于原则减弱番茄耐寒性性

2、CPK27按照调空黄大环内酯组成条件缓减高低温挤压伤

转录组测序结论表示 ，CPK27的过表示可观调涨黄大环内酯菌物自动分解相关联遗传表观遗传，如CHS、CHI和FLS等，并且黄大环内酯代谢率通道可观丰度。而CPK27甲基化体中这遗传表观遗传表示变动，表示CPK27能够有助于黄大环内酯自动分解的帮助茎叶缓解放松超低温胁迫给我们的阳极氧化气压（图2a-e）。

图2 RNA-seq概述CPK27调节作用的冷回应基因组

3、HY5是CPK27介导的抗寒网络信号径路中的重要靶标

为确认 CPK27 与 HY5 的主动目的，小说拜谱生物首要做好了酵母菌双交配（Y2H）实验报告室英文，最终结杲印证这两种的存在着主动目的（图3a）。双氧分子荧光专一性（BiFC）实验报告室英文进十步表示CPK27 与 HY5 在组织核内产生主动目的（图 3b）。随着使用免疫性共放置等系统，察觉到HY5与CPK27在苔藓植物机体的存在着主动目的，且这两种的主动目的极具钙阳离子（Ca²⁺）依赖症性（图 3c）。因此，在Co-IP实验报告室英文的淀粉酶取出前产生冷胁迫补救，最终结杲体现 冷胁迫可强化HY5与CPK27的主动目的（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其首要位点

4、CPK27磷硝化作用HY5减弱其转录活力，驱动黄胺类基因组传达

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷过酸突显位点测量，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷过酸HY5并不断增强其安全稳明确

5、CPK27 在类黄酮生物制品炼制通道中目的于HY5的长江上游

合理什么是基因形容和分泌物解析结局（图5），CPK27在冷胁迫加载失败的过程 中决定于HY5的中下游，确认干预 HY5 介导的类黄酮动物组成径路决定草本花卉耐寒性性。

图5 CPK27功能于HY5长江上游

二、软文总结ppt

综合上面的根据上述，本论文调查表面CPK27磷酸性反应绘制HY5蛋白质，启用类黄酮分解成路径，利于抗氧反应东西积累更多，借以明显增强抗寒功能。该调查相一致了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调整制度化（图6），得知CPK27介导的HY5磷酸性反应是接触钙4g信号与次生代谢率防守的重点步骤，为的理解草本花卉磨难反映网给出了新层面。

图6 CPK27-HY5摸块不断提高草本植物耐受性冷胁迫的长效机制

三、拜谱个人心得体会

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球核苷酸组学、淡化球核苷酸组学、代谢率组学、转录组学等两组学护肤品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

选取学术论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134